StarBright Yellow Dyes

SBY575は、当社の新しいStarBright Yellow Dyeシリーズの第一弾です。この色素は、561 nmの明るい励起光で、579 nmで発光し、狭い励起および発光プロファイルを持っています。

PEほどではありませんが、明るい色素であることに変わりはありません（図3）。488 nmのレーザーで同じ程度まで励起されないという利点もあります。

その結果、従来のフローサイトメトリーで488 nm励起色素を含むパネルを構築する際に、スピルオーバーが少なくなります。StarBright Yellow 575 Dye はユニークなスペクトルを持つため、PE と共にフルスペクトルのフローサイトメトリーで使用することが可能です。

StarBright Yellow Dyes は、他の StarBright Dyes や従来の蛍光色素とうまく組み合わせて使用することができます。図4は、ヒト末梢血におけるナイーブおよびメモリー状態を含む一般的なサブセットと希少なサブセットの識別に使用する方法を示しています。

図3. 輝度の比較。ヒト末梢血をCD4 SBY575（MCA1267SBY575）（赤）、またはCD4 PE（青）で染色し、577/15フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで解析した。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定された。

SBY605は、561nmの明るい励起色素で、同様の発光を持つPE-tandemとは異なり、488nmのレーザーでは励起されないユニークで狭い発光を示します。

従来型フローサイトメトリーおよびスペクトル型フローサイトメトリーでの使用に適しており、特別なバッファーを必要とせず、他のStarBright Dyesと互換性があり、561 nmレーザーで励起するとPE-Dazzle594と同じ明るさになります（図4）。

SBY605は従来のタンデム色素ではないため、PEベースのタンデム色素とは異なり、PFAやアルコールベースの固定剤で固定してもシグナルの損失やスペクトルプロファイルの変化はなく、スピルオーバーを低減して実験に柔軟性をもたらします。

図4. 輝度比較。 ヒト末梢血をCD4 SBY605（MCA1267SBY605）（赤）、またはCD4 PE-Dazzle594（青）で染色し、615/24フィルターを使用して検出したZE5 Cell Analyzerで解析した。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定した。

SBY720は、ユニークで狭い発光を持つ、明るい561nmの励起色素です。より明るく、488 nmの励起が抑えられ、PFAやアルコールベースのバッファーに固定可能で、シグナルの損失やスペクトルの変化がないため、マルチカラーパネルにおいてPE-Cy5.5やPE-A700の代わりに使用することができます（図5）。

さらに、従来のタンデム色素ではないため、アクセプターとドナーのアンカップリングによる経時的な発光の変化がなく、再現性のあるデータを得ることができます。

他のStarBright色素と同様に、SBY720は他のStarBright色素や他の蛍光色素と特別なバッファーを必要とせずにマルチプレックス化でき、パネル内であらかじめ混合して4⁰Cで1ヶ月以上保存しても染色性に変化がありません。

図5. 輝度比較。 ヒト末梢血をCD4 SBY720 (MCA1267SBY720) (赤)、CD4 PE-Cy5.5 (青)、またはCD4 PE-A700 で染色し、720/60フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで解析しました。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定した。