StarBright Violet Dyes

バイオ・ラッドは、9種類のStarBright Violet Dyesをヒトとマウスのマーカー抗体とストレプトアビジンに標識した製品を発売しています。

SBV440  SBV475  SBV515  SBV570  SBV610  SBV670  SBV710  SBV760  SBV790

StarBright Violet (SBV) Dyeは、405 nm のレーザーで励起され、440 nm から 790 nm までの広い範囲で最大蛍光を示すため、従来のフローサイトメトリーやスペクトル式のフローサイトメトリーで 405 レーザーを用いたマルチカラーパネルを構築する際に最適な選択となるよう設計されています。

明るく、光安定性に優れ、ほとんどのバッファーに適合し、狭い励起および蛍光スペクトルを持ちます。



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StarBright Violet Dyes - Superior Staining with StarBright Dyes

以下の表は発売中のSBV Dyesを掲載しています。

SBV Dye Range

StarBright Dye

Max Ex, nm

Max Em, nm

Brightness (1–5)

ZE5 Cell Analyzer Optimal Filter

Comparison Dye

発売

StarBright Violet 440 Dye

383

436

5

460/22

Super Bright (SB) 436 , Pacific Blue, eFluor 450

発売中

StarBright Violet 475  Dye

405

479

4

525/50

Brilliant Violet (BV) 480

発売中

StarBright Violet 515  Dye

402

516

4

525/50

BV510, Amethyst Orange

発売中

StarBright Violet 570  Dye

404

571

4

615/24

BV570

発売中

StarBright Violet 610  Dye

403

607

4

615/24

BV605, SB600

発売中

StarBright Violet 670  Dye

401

667

5

670/30

BV650, SB645

発売中

StarBright Violet 710  Dye

402

713

5

720/60

BV711, SB702

発売中

StarBright Violet 760  Dye

403

754

5

750LP

BV750

発売中

StarBright Violet 790  Dye

402

782

4

750LP

BV785, SB780

発売中



図1. StarBright Violet Dyeの励起および蛍光スペクトル

StarBright Violet Dye詳細

各色素の使用方法、従来のスペクトル(波長とチャンネル)、輝度比較データなど、より詳細な情報を掲載しています。



StarBright Violet 440 (SBV440) Dye は、BV421, SB436, Pacific Blue, V450, vioBlue, Alexa 405 などの420~480 nm に最大発光を持つ蛍光色素の代替に最適な色素です。405 nm のVioletレーザーで励起され、436 nm で蛍光を発するため、ZE5 Cell Analyzerの 460/22 フィルターや他の装置の同様のフィルター (450/50 など) を使用して検出することが可能です。これにより、暗い蛍光色素は低発現のマーカーを検出するには適さないため、より多くの選択肢と柔軟性を得ることができます。

図2. StarBright Violet 440 A:スペクトルデータ。Violetレーザーによる励起(点線)、蛍光は塗潰しのヒストグラムで示す。 B: 完全な色素分布。すべての波長での蛍光を示す完全な蛍光スペクトル。データは、SpectroFlo ソフトウェアを使用して Cytek Aurora Flow Cytometry System で測定された。



図3. 明るさの比較。マウス末梢血をCD4SBV440(MCA2691SBV440)(赤)、CD4 Pacific Blue(青)、またはCD4 SuperBright 436(緑)で染色し、460/22フィルターを用いてZE5 Cell Analyzerで検出・解析したもの。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定を行った。

図4. SBV440の優れた性能。ヒト末梢血中のB細胞およびT細胞集団を識別する6色パネルにおいて、SBV440はPEを使用するよりもCD127lo CD25+ Tregの分解能に優れています。使用した抗体 CD19PE-750 (MCA1940P750), CD3A488 (MCA463A488), CD127A647, CD4A700 (MCA1267A700), CD8PE-A647,CD25PE (MCA2127PE) または CD25SBV440 (MCA2125SBV440) を使用しています。



StarBright Violet 440 抗体

StarBright Violet 475 (SBV475) Dye は、405 nm のVioletレーザーで励起され、479 nm で発光するため、ほとんどの装置で使用できる標準フィルターで容易に検出できます。StarBright Violet 475 Dye はスペクトルフローサイトメトリーにも対応しており、独自のプロファイルにより、新規および既存のフローサイトメーターパネルに組み入れ、柔軟性と多重化能力を向上させることができます。このユニークなプロファイルにより、StarBright Violet 515 (SBV515) Dye や Brilliant Violet 510 (BV510) と組み合わせて、フルスペクトラムのフローサイトメトリーでパネルに使用することができます。

図5. SBV475。 A:蛍光スペクトル。Violetレーザーによる励起(点線)、蛍光は塗潰しのヒストグラムで示す。B:すべての波長域での蛍光を示す完全な蛍光スペクトル。データは、SpectroFlo ソフトウェアを使用して Cytek Aurora Flow Cytometry System で測定された。



図6. 蛍光輝度の比較。ヒト末梢血をCD4SBV475(MCA1267SBV475)(赤)、またはCD4 BV480(青)で染色し、525/50フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで解析した。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定された。



図7. ヒト末梢血を、A:CD3SBB700 (MCA463SBB700) および CD4SBV475 (MCA1267SBV475); B:CD3BV711 (BD) および CD4SBV475 (MCA1267SBV475) で染色したものです。C:CD14A488(MCA1568A488)およびCD33SBV475(MCA1271SBV475);ならびにD:CD3A700(MCA463A700)およびCD27SBV475(MCA755SBV475)。すべての染色は、Brilliant Bufferで染色した(D)とは別に、10%ヒト血清でブロッキングした後、1%BSAを含むPBS中、4℃で行った。細胞はZE5 Cell Analyzerで解析した。



StarBright Violet 475 抗体

StarBright Violet 515 (SBV515) Dyeは、405nmのVioletレーザーで励起され、515nmで蛍光を発するため、Pacific Orange、Krome Orange、vioGreen、Brilliant Violet 510など、500~550nmに最大発光を持つ蛍光色素の代替に最適な色素で、525/50フィルター(または同様のフィルター)でフローサイトメトリー実験において検出可能です。

図8. SBBV515。 A:蛍光スペクトル。Violetレーザーによる励起(点線)、蛍光は塗潰しのヒストグラムで示す。B:SBV515のすべての波長域での発光を示す完全な蛍光スペクトル。データは、SpectroFlo ソフトウェアを使用して Cytek Aurora Flow Cytometry System で測定された。



図9. 明るさの比較。 マウス末梢血をCD4SBV515(MCA2691SBV515)(赤)、またはCD4BV510(青)で染色し、525/50フィルターを用いてZE5 Cell Analyzerで検出・解析した。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定されている。



図10. SBV515の染色例。 ヒトまたはマウス末梢血を、A:CD45RASBV515 (MCA88SBV515) およびCD45ROSBV610 (MCA461SBV610) B:CD8SBV515 (MCA1226SBV515) およびCD4BV510 C:CD19SBV515(MCA1439SBV515)およびCD45RSBV475(MCA1258SBV515)およびD:CD27SBV515(MCA755SBV515)およびCD3A647(MCA463A647)。すべての染色は、10%血清でブロッキングした後、1%BSAを含むPBS中、4℃で行った。細胞は、Cytek Auroraで解析したBを除き、ZE5 Cell Analyzerで解析した。



StarBright Violet 515 抗体

StarBright Violet 570 (SBV570) Dyeは、405 nmの Violetレーザーで励起され、570 nmで蛍光を発する色素です。Brilliant Violet 570 (BV570) のような励起および蛍光プロファイルが類似した色素よりも明るく、PE へのスピルオーバーが低減されています。SBV570 は ZE5 Cell Analyzerを使用して検出できますが、405 nm レーザーを搭載した S3e セルソーターでは、構成に応じて 586/25 または 593/40 フィルターを備えているため、SBV570 が最適に検出されます。また、そのユニークなスペクトルプロファイルから、同様のフィルターを備えたセルアナライザーやソーター、およびスペクトルフローサイトメーターでの使用にも適しています。

図11. SBV570。 A:蛍光スペクトル。Violetレーザーによる励起(点線)、蛍光は塗潰しのヒストグラムで示されている。 B: すべての波長での発光を示す完全な蛍光スペクトル。データは、SpectroFlo ソフトウェアを使用して Cytek Aurora Flow Cytometry System で測定された。



図12. 明るさの比較。 ヒト末梢血をCD4SBV570(MCA1267SBV570)(赤)、またはCD4BV570(青)で染色し、615/24フィルターを用いてZE5 Cell Analyzerで検出・解析した。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定された。



図13. StarBright Dyeの使用により、ソーティングの純度と回収率が向上。 ヒトPBMCをCD3 FITC(MCA463F)とA: CD8SBV570またはB:CD8SBV570(MCA1226SBV570) で染色したものです。回収した細胞数と純度(%)をプロットで示した。



StarBright Violet 570 抗体

StarBright Violet 610 (SBV610) Dye は、405 nm のVioletレーザーで励起され、607 nm で最大の蛍光を示します。ZE5 Cell Analyzerの 615/24 フィルター、または他の装置の同様のフィルターを使用すると、最適に検出されます。StarBright Violet 610 Dye は、スペクトルフローサイトメーターとの互換性があり、独自のプロファイルを持つため、新規および既存のフローサイトメトリーパネルに組み込むことができます。



図14. StarBright Violet 610 Dye(SBV610) 。 A:蛍光スペクトル。Violetレーザーによる励起(点線)と、塗りつぶしのヒストグラムで示された蛍光波長。 B:すべての波長での蛍光を示すフルエミッションスペクトル。データは、SpectroFlo ソフトウェアを使用して Cytek Aurora Flow Cytometry System で測定された。



図15. 明るさの比較 。 ヒト末梢血をCD4SBV610(MCA1267SBV610)(赤)、またはCD4 BV605(青)で染色し、615/24フィルターを用いてZE5 Cell Analyzerで検出・解析した。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定された。



図16. SBV610の染色例 。 ヒト末梢血を、A:CD4SBV610 (MCA1267SBV610) および CD8SBV710 (MCA1226SBV710)  B:CD8SBV610 (MCA1226SBV610) および CD4BV605 (BD)  C:CD7 Biotin (MCA1197B) および Streptavidin SBV610 (STAR210SBV610)  D:CD62LSBV610 (MCA1076SBV610) および CD3A647 (MCA463A647)で染色した。すべての染色は、10%血清でブロッキングした後、1%BSAを含むPBS中、4℃で行った。細胞は、Cytek Auroraで解析したBを除き、ZE5 Cell Analyzerで解析した。



StarBright Violet 610 抗体

StarBright Violet 670 (SBV670) Dye は、405 nm のVioletレーザーで励起され、667 nm で最大蛍光を示します。ZE5 Cell Analyzerの 670/30 フィルターや他の装置の同様のフィルターを使用して、PE-A674 および A647 チャンネルへのスピルオーバーを低減しながら検出することが可能です。SBV670 Dye はスペクトルフローサイトメーターにも対応しており、独自のプロファイルを持つため、新規および既存のフローサイトメトリーパネルへの組み込みが可能です。

図17. SBV670。 A:蛍光スペクトル。Violetレーザーによる励起(点線)、蛍光は塗潰しのヒストグラムで示す。B:すべての波長域でのエミッションを示す完全な蛍光スペクトル。データは、SpectroFlo ソフトウェアを使用して Cytek Aurora Flow Cytometry System で測定された。



図18. 輝度の比較。 ヒト末梢血をCD4SBV670(MCA1267SBV670)(赤)、またはCD4BV650(青)で染色し、670/30フィルターを用いてZE5 Cell Analyzerで検出・解析した。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定された。



図19. SBV670の染色例。 マウス骨髄(A)またはヒト末梢血(B-D)を、A:CD11bSBV440(MCA711SBV440)およびCD117SBV670(MCA1365SBV670) B:CD45RASBV610 (MCA88SBV610) および CD27SBV670 (MCA755SBV670) C:CD3A488 (MCA463A488) および CD69SBV670 (MCA2806SBV670)  D:CD4SBB580 および CD31SBV670 (MCA1738SBV670)で染色した。すべての染色は、10%血清でブロッキングした後、1%BSAを含むPBS中、4℃で実施した。細胞は、Cytek Auroraで分析したDを除き、ZE5 Cell Analyzerで分析した。



StarBright Violet 670 抗体

StarBright Violet 710 (SBV710) Dye は、405 nm のVioletレーザーで励起され、713 nm で最大の蛍光を示します。ZE5 Cell Analyzerの 720/60 フィルターや他の装置の同様のフィルターを使用して、特に A700 チャンネルへのスピルオーバーを抑えて検出することが可能です。SBV710 Dye はスペクトルフローサイトメトリーにも対応しており、独自のプロファイルを持つため、新規および既存のフローサイトメトリーパネルに組み込むことができます。

図20. SBV710。 A:蛍光スペクトル。Violetレーザーによる励起(点線)、蛍光は塗潰しのヒストグラムで示されている。 B:すべての波長域での発光を示す完全な蛍光スペクトル。データは、SpectroFlo ソフトウェアを使用して Cytek Aurora Flow Cytometry System で収集された。



図21. 輝度比較。 ヒト末梢血をCD4SBV710(MCA1267SBV710)(赤)、またはCD4 BV711(青)で染色し、720/60フィルターを用いてZE5 Cell Analyzerで検出・解析しました。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定された。



図22. SBV710の染色例。 ヒト末梢血を、A:CD3A488 (MCA463A488) および CD69SBV710 (MCA2806SBV710)  B: CD3SBV440 (MCA463SBV440) および HLA DP/DQ/DRSSBV710 (MCA477SBV710)  C:CD4SBUV510 (MCA1267SBUV510) および CD8SBV710 (MCA1226SBV710)  D:TCRgdBV711 および CD14SBV710 (MCA1568SBV710)で染色した。 すべての染色は、10%血清でブロッキングした後、1%BSAを含むPBS中、4℃で行った。細胞は、Cytek Auroraで分析したDを除いて、ZE5 Cell Analyzerで分析した。



StarBright Violet 710 抗体

StarBright Violet 760 (SBV760) Dye は、405 nm のVioletレーザーで励起され、760 nm で最大蛍光を示します。ZE5 Cell Analyzerの 750LP フィルター、または他の装置の同様のフィルターを使用して検出できます。SBV760 Dye は、他の色素と同様の発光プロファイルを持ちますが、より明るく、陽性集団と陰性集団の分離に優れています。

図23. SBV760。 A:蛍光スペクトル。Violetレーザーによる励起(点線)、蛍光は塗潰しのヒストグラムで示す。 B:すべての波長域での発光を示す完全な蛍光スペクトル。データは、SpectroFlo ソフトウェアを使用して Cytek Aurora Flow Cytometry System で測定した。



図24. 輝度の比較。 ヒト末梢血をCD4SBV760(MCA1267SBV760)(赤)、またはCD4 BV750(青)で染色し、750LPフィルターを用いてZE5 Cell Analyzerで検出・解析しました。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定された。



図25. SBV760の染色例。 ヒト末梢血(A-C)またはマウス末梢血(D)を、A:CD16A647 (MCA2537A647)および CD14SBV760 (MCA1568SBV760)  B:CD3A647 (MCA463A647)とCD38 (MCA1039SBV760) C:CD3SBV440(MCA463SBV440)およびCD28SBV760(MCA709SBV760) D:CD8aSBUV400(MCA609SBUV400)およびCD161SBV760(MCA1266SBV760)で染色した。。すべての染色は、10%血清でブロッキングした後、1%BSAを含むPBS中、4℃で行った。細胞はZE5 Cell Analyzerで解析した。



StarBright Violet 760 抗体

StarBright Violet 790 (SBV790) Dye は、405 nm のVioletレーザーで励起され、782 nm で最大蛍光を示します。ZE5 Cell Analyzerの750LPフィルターや他の装置の同様のフィルターを用いて検出することができます。SBV790 Dyeはスペクトルフローサイトメーターにも対応しており、独自のプロファイルを有しているため、新規および既存のフローサイトメトリーパネルに組み込むことが可能です。

図26. SBV790。 A:蛍光スペクトル。Violetレーザーによる励起(点線)、蛍光は塗潰しのヒストグラムで示す。 B:すべての波長域での発光を示す完全な蛍光スペクトル。データは、SpectroFlo ソフトウェアを使用して Cytek Aurora Flow Cytometry System で測定された。



図27. 輝度の比較。 ヒト末梢血をCD4SBV790(MCA1267SBV790)(赤)、またはCD4 BV785(青)で染色し、670/30フィルターを用いて検出したZE5 Cell Analyzerで解析した。すべての抗体は、最適な濃度を決定するために、使用前に滴定されました。



図28. SBV790の染色例。 ヒト末梢血(A-C)またはマウス骨髄(D)を、A:CD16A700(MCA2537A700)およびCD14SBV790(MCA1568SBV790) B:CD14SBV710 (MCA1568SBV710) および HLA DP/DQ/DRSBV790 (MCA477SBV790)  C:CD20SBV515 (MCA1710SBV515) および CD19SBV790 (MCA1910SBV790)  D:CD19A488 (MCA1258A488) および CD45RSBV790 (MCA1439SBV790) を使用した。すべての染色は、10%血清でブロッキングした後、1%BSAを含むPBS中、4℃で行った。細胞はZE5 Cell Analyzerで解析した。



StarBright Violet 790 抗体