StarBright Blue (SBB) Dyes は、488 nm レーザーで励起されるため、フローサイトメトリーパネルの既存色素の置き換えに最適で、Blueレーザーでのを検出を拡張することができます。
StarBright Dyeの狭い励起波長により、561 nmと640 nmレーザーによる励起が抑えられ、ほとんどの細胞集団を分離するのに十分な明るさに設計されているため、StarBright Blue Dyesはパネルデザインにおける最初の選択肢として最適です。
SBB Dye Range
StarBright Dye |
Max Ex, nm |
Max Em, nm |
Brightness (1-5) |
5-Laser ZE5 Cell Analyzer Optimal Filter |
3/4-Laser ZE5 Cell Analyzer Optimal Filter |
Comparison Dye |
発売 |
---|---|---|---|---|---|---|---|
StarBright Blue 580 Dye |
475 |
582 |
4 |
593/52 |
583/30 |
- |
発売中 |
StarBright Blue 615 Dye |
475 |
612 |
4 |
593/52 |
615/24 |
- |
発売中 |
StarBright Blue 675 Dye |
476 |
675 |
5 |
692/80 |
692/80 |
PerCP |
発売中 |
StarBright Blue 700 Dye |
473 |
703 |
5 |
692/80 |
692/80 |
PerCP-Cy5.5, BB700, PerCP-eFluor710 |
発売中 |
StarBright Blue 765 Dye |
476 |
764 |
4 |
750LP |
750LP |
- |
発売中 |
StarBright Blue 810 Dye |
477 |
802 |
4 |
750LP |
750LP |
- |
発売中 |
略語: Axxx:Alexa Fluor、 BB:Brilliant Blue、;Cy:シアニン(cyanine)、 FITC:フルオレセインイソチオシアネート(fluorescein isothiocyanate)、 PerCP:ペリジニンクロロフィルタンパク質(peridinin chlorophyll protein)。
図1. StarBright Blue Dyeの励起および蛍光スペクトル
SBB580 Dyeは、独自の狭い励起・発光プロファイルを持つ明るい488 nmレーザー励起色素で、従来型フローサイトメーターおよびスペクトル式フローサイトメーターに適しています(図2)。 AF532のような他の488 nmレーザー励起色素よりも明るく、488 nmレーザーで励起するとPEと同程度の明るさになります。 また、PE と比較して、561 nm レーザーによる励起が抑えられるという利点もあります。SBB580とPEは、それぞれの色素を励起するために488nmと561nmの両方のレーザーを使用する場合、パネル内で互換性があります。 これにより、多色パネルを構築する際の選択肢と柔軟性が高まります。 |
図2. 明るさの比較。ヒト末梢血をCD4 SBB580 (MCA1267SBB580) またはCD4 AF532とCD4 PEで染色したものです。SBB580はAF532の10倍以上の明るさで、PEと同程度の明るさである。 |
StarBright Blue 580抗体 |
SBB615 Dye は、明るい 488 nm レーザー励起色素で、ユニークで狭い励起および発光プロファイルを持ち、フローサイトメーターおよびスペクトル式フローサイトメーターに適しています(図 3)。 488 nm で励起すると PE-CF594 や PE-Dazzle594 よりも明るく、561 nm レーザーでは励起されません。 従来のタンデム色素ではないため、SBB615 にはタンデム分解や経時的な染色性の変化に関する問題がありません。SBB615は、488nmレーザーを組み込んだマルチカラーパネルを構築する際に、より多くの選択肢と柔軟性を提供します。 |
図3. 明るさの比較。ヒト末梢血をCD4 SBB615 (MCA1267SBB615), CD4 PE-CF594, またはCD4 PE-Dazzle-594 で染色したものです。SBB615はPE-CF594やPE-Dazzle594に比べて2倍以上明るい。 |
StarBright Blue 615抗体 |
SBB675 Dyeは、非常に明るい488 nmレーザー励起色素で、独自の狭い励起・発光プロファイルを持ち、従来型フローサイトメーターおよびスペクトル式フローサイトメーターに適しています(図4)。 488nmレーザーで励起した場合、PerCP-Cy5.5(およびPerCP)やBB700、PE-Cy5といった他の488nmレーザー励起色素よりも明るくなります。従来のタンデム色素ではないため、SBB675はタンデム分解や経時的な染色性の変化に関する問題がない。 また、PEタンデム色素と比較して、561 nmレーザーによる励起が抑制されています。SBB675は、488 nmレーザーを用いたマルチカラーパネルを構築する際に、より多くの選択肢と柔軟性を提供します。 |
図4. 明るさの比較。ヒト末梢血をCD4 SBB675 (MCA1267SBB675), CD4 PerCP-Cy5.5, CD4 BB700, CD4 PE-Cy5 で染色。 SBB675はPerCP-Cy5.5の10倍、BB700の5倍の明るさであった。 |
StarBright Blue 675抗体 |
StarBright Blue 700 (SBB700) Dyeは、フローサイトメトリー実験において、PerCP、PerCP-Cy5.5などのPerCPベースのタンデム色素、Brilliant Blue 700 (BB700) に代わる色素として最適なものです。BB700と同程度の明るさで、PerCP-Cy5.5よりも明るい蛍光です(図5)。さらに、SBB700は独自のスペクトルプロファイルを持っているため、PerCP-Cy5.5やBB700と組み合わせて、スペクトル方式フローサイトメトリー実験が可能です(図6)。
図5. StarBright Blue 700とPerCP-Cy5.5の輝度の比較。 CD4 PerCP-Cy5.5とCD4 BB700で染色したマウス血液をCD4 SBB700と比較すると、新しいStarBright Dyeの染色指数(SI)と輝度が向上していることがわかる。
SBB700は、輝度の向上に加えて、640nmのレーザーによる励起が減少しているため、A647やA700と組み合わせたマルチカラーパネルでは、PerCP-Cy5.5やBB700と比較してコンペンセーションの必要が少なくなっています。
SBB700とStarBright Violet 710 (SBV710) Dyeの組み合わせでは、比較的高いレベルのコンペンセーションが必要となり、値が2程度に広がることがあります。 これは大きな問題ではありませんが、通常のフローでは、この組み合わせには相互排他的マーカーを用いることを推奨します。この組み合わせは、スペクトルフローサイトメトリーで類似度0.64(SpectroFlo Softwareで決定)であり、使用するには優れた組み合わせです。
図6. StarBright Blue 700 Dyeのスペクトルフローサイトメトリー結果。
A:SBB700の全励起スペクトルは、すべての波長で発光していることを示します。
B:ヒト末梢血単球をCD20 PerCP-Cy5.5 およびCD45RO SBB700 (MCA461SBB700) で染色し、古典的、中間、および非古典的単球集団を明らかにした。
データは、SpectroFlo Softwareを使用してCytek Aurora Flow Cytometry Systemで測定されました。
StarBright Blue 700 抗体
関連資料
StarBright Dyesの詳細と、これらの製品がどのようにフローサイトメトリー実験の効果を向上させるかについては、StarBright Dyesのページをご覧ください。
蛍光色素とイムノフェノタイピングに関する有用な情報は、フローサイトメトリーに関する資料ページに掲載されています。このアプリケーションの基礎知識を学びたい方は、フローサイトメトリー基礎ガイドをご覧ください。